α-葡萄糖苷酶（嗜热脂肪芽孢杆菌）（重组）

重组 - 热稳定

E-TSAGS

货号：AS000007

EC: 3.2.1.20

同义词： α-葡萄糖苷酶；α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶

CAZy Family: GH13

CAS: 9001-42-7

特性

电泳纯度：

- SDS 凝胶电泳上的单条带（MW ~ 66,000）

- 等电聚焦上的单一主带（pI ~ 6.7）

酶活检测方法：

定义酶活活性：在pH 6.5和40°C下，在405 nm下每分钟从4-硝基苯基 α-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG）产生1µmol对硝基苯酚（pNP）所需的酶量为一个酶活力单位。pNP在波长405nm处有吸收峰，采用酶标仪在405nm处测定的吸光度，以此计算产物pNP的含量。

以pNP为标准溶液绘制标准曲线，梯度稀释：用0.1mol/L PBS（pH 6.5）配置250 umol/L对硝基苯酚，分别稀释成200, 150，100，50，25，5，0 umol/L，取各梯度标准液100ul，再加入显色液100ul 1mol/L Na₂CO₃溶液，测定OD₄₀₅的，绘制酶活标准曲线。

样品酶活检测：取20ul 5mM pNPG和60ul 0.1mol/L PBS（pH 6.5）及适度稀释的酶液20ul，混匀后在40℃水浴锅中反应10min后立即加入100ul 1mol/L Na₂CO₃溶液使反应终止并显色，然后检测OD₄₀₅。

酶活力（U/mL）= C × 50 × N/10

C——测定酶液吸光值对应曲线上的pNP浓度；

50——将20ul稀释酶液中的活性折算为1ml酶液时的活性；

N——原酶液稀释倍数；

10——反应时间。