马来酰亚胺活化型过氧化物酶（POD）

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Maleimide activated HRP | HRP-MAL | HRP | Maleimide activated | Maleimide-HRP | Maleimide activated-HRP | Horseradish Peroxidase Maleimide Conjugate | HRP Maleimide Conjugate | HRP Maleimide

P755394-5mg

5mg

生物活性

≥200 U/mg powder

马来酰亚胺活化型过氧化物酶（POD）专为易于与含有或已修饰成含有巯基的化合物结合而设计。 此试剂预先活化，含有每摩尔过氧化物酶1.0-3.0摩尔马来酰亚胺，可直接偶联任何含巯基化合物，无需进一步修饰。马来酰亚胺与巯基的相互作用高度特异且高效，形成稳定的硫醚键。 处理说明 偶联方法： 1. 将产品复溶至2-5 mg/ml，溶于0.15 M氯化钠中，1 M磷酸钠pH 7.0。为了促进高效偶联，缓冲液使用前应脱气并用氮气或氩气吹扫。此外，制备缓冲液所用的水应不含微量重金属和其他氧化剂。 偶联反应可在棕色瓶中进行，以防止光线催化氧化。 2. 将待偶联的巯基化合物溶解于第1步中使用的相同缓冲液中，浓度为2-5 mg/ml。通常每摩尔巯基化合物应使用1-2摩尔过氧化物酶。过氧化物酶的分子量为40,000。 注意：如果偶联化合物是SATA 激活，按照参考文献应添加N-羟胺以启动偶联反应。 3. 在室温下轻轻搅拌3小时。 通过加入1 M 2-巯基乙醇至终浓 度为0.0015 M，阻断任何剩余的马来酰亚胺基团。 搅拌15分钟。 4. 通过加入0.3 M N-乙基马来酰亚胺来阻断任何剩余的巯基将N，N’-二甲基甲酰胺（DMF）加入至终浓度为0.003 M。 如果酶的天然巯基被阻断，一些酶可能会失去显著的活性。在这种情况下，应消除硫醇阻断步骤。 5. 然后通过色谱法或透析法将偶联物交换到适当的缓冲液中，以便将其置于所需的介质中使用。对于长期储存，应将偶联物与50%甘油一起储存在-20°C 下。 6. 出于分析目的，约5-10 μg结合物/ml将提供足够的信号用于检测。 *此程序通常允许与典型蛋白质高效结合。然而，在某些条件下，可能需要更高灵敏度的偶联物。 产品应用 1. 用于直接偶联到含有游离巯基团的化合物中，用作酶联检测试剂。 2. 马来酰亚胺化合物4-马来酰亚胺丁酸琥珀酰亚胺和6-马来酰亚胺己酸琥珀酰亚胺已被证明是Fab′与辣根过氧化物酶偶联的最有效方法。 3. 被用于一项研究，以调查其对线粒体蛋白脂酰胺脱氢酶的染色效果。 4. 提高免疫偶联物的信号强度，对免疫球蛋白进行了合成修饰，使其含有多个伯胺，并与马来酰亚胺激活的过氧化物酶共价结合。这可以导致更有效的偶联和信号放大。

Removal of H2O2, oxidation of toxic reductants, biosynthesis and degradation of lignin, suberization, auxin catabolism, response to environmental stresses such as wounding, pathogen attack and oxidative stress. These functions might be dependent on each isozyme/isoform in each plant tissue.

≥200 U/mg powder

天然

Horseradish